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快速、灵敏安全的考马斯蛋白染色
[ 文章来源: | 文章作者: | 发布时间:2006-10-31|  字体: [ ]  

快速方便的染色步骤

SimplyBlue™ SafeStain的实验步骤易于操作,在不到3个小时的时间内就能完成,条带在染色液中马上可以显现,不需要脱色,但是为了达到最佳灵敏度,可以使用基于水的脱色步骤。

灵敏的染色结果

SimplyBlue™ SafeStain融合了独特的胶体状考马斯G-250染色液和一种优化的染色步骤,达到纳克级的灵敏度,1微克蛋白在染液中5分钟就可以检测到,使用额外的基于水的脱色可以检测到7ng蛋白(还原型BSA)(图1)。

图1 使用SimplyBlue™ SafeStain灵敏的染色结果
下列样品在Nupage® Novex 4-12% Bis-Tris gel上分离,然后使用SimplyBlue™ SafeStain染色。
Lane1 : 6 µg protein mix
Lane 2: 1 µg rabbit IgG
Lane 3: 1 µg reduced BSA
Lane 4: 5 µg E. coli lysate
Lane 5: 20 ng reduced BSA
Lane 6: 10 ng reduced BSA
Lane 7: 7 ng reduced BSA
Lane 8: 3 ng reduced BSA
Lane 9: 10 µg Mark12™ Satndard
Lane 10: 5 µg Mark12™ Standard

安全无害的染色液

不象传统的R-250和部分G-250染液,SimplyBlue™ SafeStain不需要甲醇或醋酸固定/脱色,避免了暴露在有毒物质和异味中的危险,创造了一个更安全的实验室环境。因为使用SimplyBlue™ SafeStain不需要有害物质的相关花费,你节省了有毒物品的运输、储存和处理费用,独立测试确认SimplyBlue™ SafeStain无毒、无害、不易燃烧且无腐蚀性。在大多数地区,SimplyBlue™ SafeStain可以直接倒入下水道。

质谱兼容的染液

使用SimplyBlue™ SafeStain染色的蛋白和质谱分析兼容,所以你将得到目的蛋白最佳覆盖度(图2,3表1)。

图2 菠菜染色质提取物的双向电泳(2DE)实验;用SimplyBlue™ SafeStain染色
用ZOOM® IEF Fractionator对菠菜染色质提取物进行预分离,不同的组分进行2D分离,使用一定pH区间的ZOOM®胶条和NuPAGE 4-12%Bis-Tris ZOOM®胶。然后用SimplyBlue™ Safestain进行染色。

图3 用SimplyBlue™ SafeStain染色的菠菜染色质 MALD1图谱
ATP合成酶CF1 β-链的 MALDI指纹

表1 用SimplyBlue™ SafeStain染色后的光谱分析结果
蛋白 %覆盖度 Z-值
1 光合体系II的放氧复合体蛋白1(菠菜) 70 2.43
2 ATP合成酶CF1 β-链(菠菜) 80 2.43
3 二磷酸核酮糖羧化酶激酶(菠菜) 63 2.43


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