|
快速方便的染色步骤
SimplyBlue™ SafeStain的实验步骤易于操作,在不到3个小时的时间内就能完成,条带在染色液中马上可以显现,不需要脱色,但是为了达到最佳灵敏度,可以使用基于水的脱色步骤。
灵敏的染色结果
SimplyBlue™ SafeStain融合了独特的胶体状考马斯G-250染色液和一种优化的染色步骤,达到纳克级的灵敏度,1微克蛋白在染液中5分钟就可以检测到,使用额外的基于水的脱色可以检测到7ng蛋白(还原型BSA)(图1)。
| 图1 使用SimplyBlue™ SafeStain灵敏的染色结果 |
 |
下列样品在Nupage® Novex 4-12% Bis-Tris gel上分离,然后使用SimplyBlue™ SafeStain染色。 Lane1 : 6 µg protein mix Lane 2: 1 µg rabbit IgG Lane 3: 1 µg reduced BSA Lane 4: 5 µg E. coli lysate Lane 5: 20 ng reduced BSA Lane 6: 10 ng reduced BSA Lane 7: 7 ng reduced BSA Lane 8: 3 ng reduced BSA Lane 9: 10 µg Mark12™ Satndard Lane 10: 5 µg Mark12™ Standard |
| 安全无害的染色液 |
不象传统的R-250和部分G-250染液,SimplyBlue™ SafeStain不需要甲醇或醋酸固定/脱色,避免了暴露在有毒物质和异味中的危险,创造了一个更安全的实验室环境。因为使用SimplyBlue™ SafeStain不需要有害物质的相关花费,你节省了有毒物品的运输、储存和处理费用,独立测试确认SimplyBlue™ SafeStain无毒、无害、不易燃烧且无腐蚀性。在大多数地区,SimplyBlue™ SafeStain可以直接倒入下水道。 |
质谱兼容的染液 |
使用SimplyBlue™ SafeStain染色的蛋白和质谱分析兼容,所以你将得到目的蛋白最佳覆盖度(图2,3和表1)。 |
| 图2 菠菜染色质提取物的双向电泳(2DE)实验;用SimplyBlue™ SafeStain染色 |
 |
| 用ZOOM® IEF Fractionator对菠菜染色质提取物进行预分离,不同的组分进行2D分离,使用一定pH区间的ZOOM®胶条和NuPAGE 4-12%Bis-Tris ZOOM®胶。然后用SimplyBlue™ Safestain进行染色。 |
|
| 图3 用SimplyBlue™ SafeStain染色的菠菜染色质 MALD1图谱 |
 |
| ATP合成酶CF1 β-链的 MALDI指纹 |
|
表1 用SimplyBlue™ SafeStain染色后的光谱分析结果
| 点 |
蛋白质 |
%覆盖度 |
Z-值 |
| 1 |
光合体系II的放氧复合体蛋白1(菠菜) |
70 |
2.43 |
| 2 |
ATP合成酶CF1 β-链(菠菜) |
80 |
2.43 |
| 3 |
二磷酸核酮糖羧化酶激酶(菠菜) |
63 |
2.43 |
|
上一篇:一个了解蛋白谱(protein profiling)的完整的解决方案 下一篇:增强膜蛋白和疏水蛋白的可溶性
|