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BCA蛋白质定量检测
[ 文章来源: | 文章作者: | 发布时间:2006-10-18|  字体: [ ]  
蛋白质的表达纯化,结构和功能的研究工作中,蛋白质的定量随处可见。但是,什么是理想的蛋白质定量方法?如何准确、快速的对蛋白质进行定量,对于不同的样本,如何选取相应的蛋白质定量试剂和方案?如何避免实验中引入的其它物质对蛋白质定量的干扰,PIERCE为这一切提供了可以信赖的解决方案。
   
PIERCE的BCA(bicinchoninic acid)蛋白质检测试剂是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠且对不同种类蛋白质变异系数甚小而深受专业人士的青睐。其中MicroBCA产品可检测到0.5μg/ml的微量蛋白,是目前已知的最灵敏的蛋白质检测试剂之一。

主要特点:
· 准确灵敏:BCA试剂的蛋白质测定范围是20-2000μg/ml,采用加强方法可检测到
  5μg/ml;MicroBCA试剂测定范围是0.5-20μg/ml。
· 快速:45分钟内完成测定,比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。
· 经济实用:除试管外,测定可在微孔板中进行,大大节约样品和试剂用量。
· 不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。
· 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考玛斯亮蓝。

基本原理:

碱性条件下,蛋白将Cu++还原为Cu+, Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。


BCA分子式:
原理图:  
 
PIERCE的BCA试剂盒所得的标准曲线:
  MicroBCA蛋白标准曲线
  BCA蛋白标准曲线

BCA蛋白质检测流程:


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