|
用光学显微镜观察的样品必须是透明的薄片，因此，要先把观察的材料制成透明的切片后，才能在显微镜下观察。徒手切片方法是观察植物内部构造的方法，徒手切片的重要工具是双面刀片，每次用后必须擦干净，注意保护，以免生锈。徒手切片的过程如下：
(一) 材料的选择:
一般选用软硬适度的植物根，茎或叶等，材料不宜太硬也不太软。切较软的材料时，可用马铃薯、胡萝卜根或肥皂将欲切的材料夹住；一起进行切片。有些叶片亦可卷成筒状再进行切片。欲切之材料应先截成适当的段块，并削平切面，一般截面的大小以不超过3-5mm2为宜，长度2-3cm，较便于手持并进行切片。
(二) 方法和步骤：
1. 切片前，在小培养皿中盛以清水，准备好毛笔，滴管和刀片等用具和欲切的材料。
2. 切片时用左手的三个指头拿住材料，并使材料稍突出在手指上，以免刀口损伤手指。右手持双面刀片，把刀刃放在经过削平的平面上，轻轻压住它，刀口向内，且与材料断面平行，然后以均匀的力量和平稳的动作，自左前方向右后方滑行切片，注意要用整个手臂向后拉（手腕不必用力）。切片时动作要敏捷，材料要一次切下（整个过程中应用清水湿润材料和刀面，使之润滑，否则材料容易破损）。如此连续动作，切下许多薄片后，就用湿毛笔将这些薄片轻轻移入已盛水的培养皿中备用。徒手切片时最重要的是切下一小片平而薄的组织，而并不要求切下一个完整的切片。
3. 用毛笔挑选最薄而透明的切片，取出放在载玻片上，制成临时装片观察；如标本有保留价值，则可再进行以下处理，制成永久标本。
（1） 将切片移入小烧杯中，经50％、60％、70％各级乙醇中进行脱水及固定，每级5分钟，然后移入1％番红染液中（用70％乙醇溶液配制）中30分钟。
（2） 继续移入80％、90％、95％各级乙醇脱水，每级5分钟。再移入1％固绿染液（用95％乙醇配制）染色30分钟，再入95％乙醇中洗去浮色，最后进入无水乙醇脱水5分钟。
（3） 切片置于无水乙醇:二甲苯＝1：1的溶液中5分钟，再移入纯二甲苯中5分钟，此时组织切片呈透明状态。
（4） 将切片置于载玻片中央，加一滴树胶，盖上盖玻片封片，待干燥后即可使用。
动物解剖的基本知识
常用解剖器械及使用方法
|
（一） 手术刀：用于切开皮肤和脏器。根据手术部位和性质的不同，可更换大小不同的刀片。手术刀有圆、尖、弯刃及大、小、长、短之分。手术刀柄有大小及长短之分，主要看所用刀片大小及手术部位的深浅而定。另有一类手术刀柄与刀片连在一起的，也有圆刃、尖头及眼科手术刀（柳叶刀）之分。
正确的持刀方法有四种：
1. 执弓式(A)：最常用，动作范围广而灵活，用于各种腹部皮肤切口等。
2. 执笔式(B)：用于切割短小的切口，用刀轻柔而操作精细，如解剖血管、神经、作腹部小切口等。
3. 握持式(C)：用于切割范围较广、用力较大的切口。
4. 反挑式(D)：用于向上挑开，以免损伤深部组织。 |
|
|
（二） 手术剪（外科剪）：在手术中有两种作用：一是剪开软组织，如剪断已结扎妥当的血管及神经、肌肉等;二是分离，利用剪刀的尖端插入组织间隙，撑开分离疏松的粘连和无血管的组织，如系膜、网膜等。使用时以大拇指和无名指分别深入下部的圆孔，以食指固定在剪刀两半的交叉点上，即可灵活操作。因用途不同而有多种类型。手术剪有弯、直两种类型，各型又分长短两种。长型的外科剪多用于深部手术。剪的尖端有尖头和钝圆头两种。前者称尖头剪，后者称钝头剪。另有一种小型的称眼科剪，也有直头和弯头之分。 |
|
|
（三） 手术镊：主要用于夹住或提起组织，以便于剥离、剪断或缝合，有时也可用于分离结缔组织。手术镊分有齿和无齿两种，并且长短不一。有齿镊用于夹持较坚韧的组织，如皮肤、筋膜、肌腱等。无齿镊用于夹持较脆弱的组织，如血管、神经、粘膜等。另有一种较小的眼科镊，也分有齿、无齿、指头和弯头。正确的执镊方法为采用食、中二指夹持镊柄，不宜于握在掌心中。 |
|
|
（四）止血钳： 用以分离组织、夹住出血的血管，提起皮肤、打结和手术缝合时持针等。 可分为直头、弯头等几种形式，常用的有以下几种：
1. 直止血钳：有长短两种，用以夹住浅层血管出血点以止血。有时也用于分离组织、牵引缝线等。必要时也可用于协助拔针。
2. 弯止血钳：也有长短两种，用以夹住深部组织或内脏的血管出血点以止血。
3. 有齿止血钳：也有直、弯两种。用以夹住较厚组织及易滑脱组织内的血管出血点以止血，如肠系膜、大网膜等，前端的齿可防止滑脱，但不能用于皮下止血。
执止血钳的姿势与执剪刀姿势相同。 |
|
|
（五）骨钳：用以咬切骨头。有剪刀式和小碟式两类，前者适用于剪切骨头，又称切骨钳（剪）；后者末端成小碟状，适用于咬切骨片，又称咬骨钳。骨钳有不同大小，根据手术的需要选用。 |
|
（六）探针：用以破坏蟾蜍或蛙的脑和脊髓。 |
|
（七）动脉夹：用以夹住动脉。夹上有橡皮，柔软却有弹性，可将分离出的动脉夹在橡皮之间。 |
注意：解剖器械只能专用，使用完毕后需洗净、擦干，放在干燥处保存。
解剖的一般方法
1. 对解剖对象要作全面的观察，分辩出前后端及背腹面，并应了解内脏器官的大致位置。
2. 了解解剖的具体要求，解剖的具体方法可因要求不同而不同。如要求观察昆虫的神经系统，应由其背部剪开，要求观察血液循环系统则要从腹面剪开。将麻醉或处死的动物固定在解剖腊盘上（小型动物如昆虫，用大头针固定）。
3. 在解剖第一刀时，一般是先用解剖镊夹起体表或皮肤，用解剖剪剪开一小口，然后再做其他较大切口。遇到血液或其他物质污染时，应先加等渗液冲洗，再用海绵或脱脂棉将水吸去，看清结构后再继续解剖。
4. 当对是否能够向前剪开或撕裂有疑问时，需首先明确前方是否有较大的血管和神经，若有，则需将其分离至一侧后，方可在另一侧剪开或撕开。
解剖的注意事项
1. 解剖的主要目的是显示被掩盖的器官或区分某一部分结构，所以应少用刀切和剪刀剪，以免破坏结构，而应多使用拨、撕等分离方法。切不可随意切除内部脏器，否则将无意中丢弃所需观察的结构。
2. 尽可能保留一切可以保留的联系（特别是神经和血管的），这样才能明确地分辨出各个器官结构，也便于了解各器官、系统间的关系。
3. 解剖时要仔细、耐心，动作要轻缓，切忌急躁和盲目的大胆。要沿着器官结构的顺序解剖，切勿为观察结构而破坏了下面将要观察的结构
上一篇：生物绘图法 下一篇：微量移液的使用
|
生物绘图法