首 页网站地图RSS订阅高级搜索保留
生物实验网
设为首页
加入收藏
站长信箱
主页|bio资讯 |DNA实验 |PCR实验 |RNA实验 |蛋白实验 |基本实验技术 |生化与免疫技术 |生物信息学 |细胞生物学 |杂交实验 |学科相关 |交叉领域 |
当前位置: 主页>生化与免疫技术>免疫组织化学实验> 查看文章详细内容
站内资料搜索
热门关键字: dna  EST  r DNA  pcr  抗体  rt pcr  t dna  tail pcr  PCR sscp  cDNA

相关文章
>免疫组织化学在乳腺癌的作
>免疫组化阳性病例的评判及
>免疫组织化学技术常用试剂
>免疫组化小贴士
>促甲状腺激素标记免疫分析
>溶菌酶的测定
>酶联免疫吸附试验及其应用
>火箭电泳技术
> 免疫球蛋白轻链的检
>免疫火箭电泳技术
热点文章
病毒生产和病毒疫苗制备
天然疫苗和人工疫苗
Histochemical assay
石蜡切片免疫组化染色步骤
免疫组化非特异性染色的消
免疫组化非特异性背景染色
免疫组化问题及解决办法
免疫组化操作规程
免疫组化常见问题的处理
免疫组化实验过程中的要点
免疫细胞化学在神经科学中的应用
[ 文章来源: | 文章作者: | 发布时间:2006-11-01|  字体: [ ]  

 近来,免疫细胞化学工作者又利用各种细胞中所含中间丝提纯制成特异性的单克隆抗体血清用于细胞学归属和病理学的检测。这些中间丝包括:①上皮细胞或上皮源细胞中的前角质蛋白(Prekeratin)或称细胞角质蛋白(cytokeratin);②心肌、平滑肌或骨骼肌细胞中的结蛋白(Desmin);③间质细胞或间充质细胞中的波形微丝(Vimentin);④神经胶质细胞中的胶质纤维酸性蛋白(Glial Fibrillory Acidic Protein, GFAP);⑤神经细胞中的神经微丝(Neurofilament, NF)等(详见第十二章 )。实验证明,GFAP是星形胶质细胞特异性标志蛋白,具有星形胶质细胞分化潜能的肿瘤如髓母细胞瘤也含有GFAP,而少突胶质细胞和小胶质细胞呈阴性反应。肠道肌间神经丝内胶质细胞原来细胞学分类归类不明,经GFAP染色呈阳性反应,说明其中与中枢星形胶质细胞属于同一细胞学范畴。O1—O4抗原和半乳糖脑苷脂(Galactocerebroside)只存在于少突胶质细胞,griffonia simplicifloia凝集素仅对小胶质细胞呈阳性反应(小胶质细胞膜上有2—d –半乳糖)。据此,可区分不同类型的神经胶质细胞

  总之,免疫细胞化学技术的发展,解决了过去依赖Nissl 、Cajal和Golgi等传统的神经组织染色法所不能完全解决的问题。进一步揭示了神经细胞的特殊化学性质,现在神经组织内已证实的物质包括蛋白质、肽类、酶类、神经递质和胺等不下50余种,其中神经系统的特异性蛋白质有20余种,与神经元有关的除NSE外,还有神经微丝蛋白,微管蛋白,碱性蛋白(只存在于大脑神经元内的一种组蛋白)和只存在于嗅球神经元中的嗅球蛋白等;与神经胶质有关的有:神经收缩蛋白、小泡蛋白、突触蛋白(Synaptin)、GP350和D1、D2、D3等,为进一步研究神经细胞、神经胶质细胞、神经内分泌细胞及其结构成分提供了有力的手段。

  五、研究神经递质的超微结构定位

  应用免疫电子显微镜技术(常用为PAP法或胶体金标记技术)可显示抗原在神经细胞内的超微结构定位及在突触水平神经元间的联系的化学本质。Pickel应用免疫电镜观察证明TH存在于DA和DA能神经元的细胞体、树突和近侧轴突。在胞体内此酶定位于内质网、Golgi器和微管上。神经终末枝的突触小泡一般认为是神经递质的亚细胞贮存部位,在电镜下观察神经末梢内突触小泡呈现不同形态,目前已有文献报道的近10余种,比较常见的为无颗粒小泡型(Small agranular vesicles , SAV)或称清亮小泡型(Small Clear Vesicles, SCV),其直径50~90nm,中心无颗粒(图11-1E);该型常混有不同比例含致密核心的大囊泡,直径80~150nm。其次是颗粒小囊泡型(Small granular vesicles, SGV),直径45~70nm,内含有电子密度高的致密核心(图11-1A)。第三是大颗粒泡型(large granular vesicles, LGV),直径80~160nm的突触小泡内含有电子密度高的致密核心(图11-1B)。其它还有扁平囊泡型、线粒体型等(图11-1)。是否不同形态的突触小泡代表了含有不同种类的神经递质尚有争论。有学者认为不同形态的突触小泡只是使用不同种类固定液的人工假象,然而越来越多的实验证明表明,固定液的种类固然有一定影响,但神经终末突触小泡的形态和内含递质的种类似乎存在一定的相关性,SAV型是取得比较一致意见的神经终末类型,它和骨骼肌运动终板(也是神经—肌肉的突触)内所含突触小泡的形态相一致,后者已证明为乙酰胆碱神经递质的贮存处,细胞化学示Ach阳性反应,电刺激时突触小泡减少,示释放现象。这种类型的突触小泡内可能含有乙酰胆碱。

图11-1 神经末梢突触中囊泡类型

共5页: 上一页 [1] [2] 3 [4] [5] 下一页


上一篇:免疫组织化学在乳腺癌的作用(Breast carcicnoma)   下一篇:免疫组化阳性病例的评判及相关问题
设为首页 - 加入收藏 - 关于我们 - 版权申明 - 程序支持 - 联系方式 - 留言薄 - 会员中心
Power by DedeCms