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6. α-萘酚显色液(3) α-萘酚 15mg DMF 0.5ml 坚固蓝BB盐 30mg 0.05M Tris-HCL(PH9.1) 50ml 左旋咪唑 12mg 配制方法:先将α-萘酚溶于DMF中,加入坚固蓝,再加入Tris-HCL缓冲液,最后加入左旋咪唑,完全溶解过滤后立即使用。显色为37oC,15~30分钟,用0.1%中性红复染30秒~1分钟自来水冲洗,丙酮分化5秒钟,流水冲洗。 阳性结果为蓝色,细胞核为红色或紫色。 银显色液 ⑴ 硝酸银显色液 ①2%明胶(或25%阿拉伯胶水溶液) 60ml ②枸橼酸缓冲液(PH3.5) 10ml ③对苯二酚 1.7g加双蒸水至10ml ④硝酸银 50mg加双蒸水至2ml ①~③液用前依次混合,最后加入④液,注意避光。 ⑵ 乳酸银显色液 ①20%阿拉伯胶 60ml ②枸橼酸缓冲液(PH3.5) 10ml ③对苯二酚 0.85g/15ml ④乳酸银 110mg/15ml 以上①~③液用前依次混合,最后加入④液,注意避光。 上述两种显色液的25%阿拉伯胶可用双蒸水代替,但此时反应明显加快,要在镜下密切观察。 ⑶ 醋酸银显色液 ①硝酸银 100mg/50ml双蒸水 ②10%明胶 10ml ③枸橼酸缓冲液(PH3.5) 1.7g加双蒸水至10ml ④对苯二酚 600mg 配制方法:将对苯二酚溶于③液,然后将②③液混合过滤,再加入①液。 三、酶消化液 1. 0.1%胰蛋白酶 胰蛋白酶 100mg 0.1%氯化钙(PH7.8) 100ml 配制方法:先配制0.1%氯化钙,用0.1M的NaOH将其PH值调至7.8,然后加入胰蛋白酶充分溶解。用前将胰蛋白酶消化液在水溶中预热至37oC,消化时间10~30分钟。 2. 0.4%胃蛋白酶 胃蛋白酶 400mg 0.1N HCL 100ml 配制方法:先配制0.1N HCL,然后将胃蛋白酶充分溶解,预热至37oC后使用,消化时间30分钟左右。 四、粘合剂 1. 铬矾明胶液 铬矾(或甲铬矾) 0.5g 明矾(Gelatine) 5g 蒸馏水 1000ml 配制方法:先将少许蒸馏水溶解铬矾(硫酸铬钾)后,再加入明胶及蒸馏水,于70oC水溶液中胶溶化后置电动磁力搅拌器上,持续搅拌均匀,如有沉渣可过滤后使用。
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