白细胞介素6(IL-6)是一种具有多重免疫调节功能的细胞因子。HTLV-1感染的T淋巴母细胞系、单核细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞以及某些肿瘤细胞均可产生IL-6。某些急性炎症、自身免疫性疾病、淋巴细胞恶性肿瘤(如多发性骨髓瘤)等与病人体内IL-6水平异常增高有关。
㈠ 原理：IL-6在体外能促进B细胞杂交瘤的生长，故又称为杂交瘤生长因子(HGF)。小鼠B细胞杂交瘤7TD1是一株对IL-6依赖的细胞系，由Van Snick 1986年建立，只有在IL-6存在的培养基中才能生长，可以作为指示细胞来测定待检样品中IL-6水平。这类IL-6依赖的小鼠B细胞杂交瘤细胞系还有MH60·BSF2、B9等。
㈡ 方法：主要为３H-TdR掺入法
IL-6依赖的7TD1细胞用无FCS的RPMI1640洗涤2次
每次1000rpm，5min，除去原培养液中的IL-6
↓
用10％FCS-RPMI1640调整活细胞数2×10４/ml
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96孔平底培养板中每孔加100μl 7TD1悬液(2×10３/孔)
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加入不同稀释度标准IL-6和待检样品(100μl/孔)
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37℃，5％CO２孵箱培养48～72h
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每孔加３H-TdR 0.5μCi/50μl
↓10h
用多头细胞收集仪收获于玻璃纤维滤纸上
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干燥后移入液闪瓶中，加入1ml闪烁液，于液闪仪中测β射线的cpm值。
计算：
1. 根据cpm值，将能使7TD1细胞３H-TdR掺入cpm值达到最大值50％的IL-6的活性定为1u/ml。
2. 以刺激指数(SI)表示。
㈢ 试剂和器材
1. IL-6依赖的7TD1细胞系
2. 10％FCS-RPMI1640及无FCS的RPMI1640
3. ３H-TdR
4. 标准IL-6
5. PPO,POPOP,二甲苯。
6. 9999型玻璃纤维滤纸。
7. 96孔平底培养板
8. 多头细胞收集仪
9. CO２孵箱
10. β液闪计数仪
㈣ 注意事项：
1. 7TD1细胞洗涤要充分、轻柔，每次弃洗涤上清力求彻底。
2. 避免同位素污染。
3. 加样品时，应从低浓度到高浓度顺序加。
4. 加入３H-TdR最适时机是阴性对照95％以上死亡。
5. 为了增加检测方法的敏感性，可采用新复苏7TD1细胞，或用pH4.0枸椽酸缓冲液处理培养状态的7TD1细胞。
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