|
4. Tris Buffered saline (TBS) 0.05M, PH7.6 1份 Tris---HCl buffer 0.5M PH7.6 9份 0.15M NaCl Tris buffer 0.5M PH7.6 Tris 60.6g 溶于1000ml蒸馏水,用HCl调PH至7.6 5. Tris buffer HP8.2 0.1M Tris 12.12g 溶于1000ml蒸馏水,HCl调PH8.2
(四) 注意事项 1. 细胞表面抗原的强度以新鲜分离细胞制片、固定为好。若需保存最好干燥密封贮存于-20℃低温冰箱中,使用前必须充分干燥后固定。 2. APAAP中碱性磷酸酶和抗碱性磷酸酶的比例非常重要,抗体浓度过高,易封闭桥抗影响染色结果。 3. 一抗、桥抗和APAAP复合物使用的浓度视细胞表面抗原密度而定,每步洗涤要充分。 常用McAb主要检测细胞和百分率(举例) ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ CD 主要检测细胞 淋巴细胞中百分率(X±SD) 代表抗体 ─────────────────────────────────── CD1 胸腺细胞 0 Leu6, OKT6, T6 CD2 E受体阳性细胞 83±5 Leu5b, OKT11, T11,9.6 CD3 T细胞 75±7 Leu4, OKT3 CD4 辅助细胞/诱导T细胞 45±10 Leu3a, OKT4 CD5 T细胞 72±7 Leu1, OKT1, T1 CD7 T、NK细胞 75(>95% of T-ALLs) Leu9, 3A1 CD8 杀伤性T细胞/抑制性T细胞 28±9 Leu2a,2b,OKT8,OKT5,T8 CD10 普通急性淋巴母细胞白血病 >90% of common ALLs acALLA, J5 CD11 Ts、NK、Mo、粒细胞 30±5 Leu15,OKM1,Mol CD15 Mo、粒细胞 >95%成熟粒细胞, 80~100%Mo LeuM1, My1 CD16 NK和中性粒(IgG FCR) 15±7 Leu11a, b, c CD19 B 10±5 Leu12, B4 CD20 B 10±5 Leu16, B1 CD21 B(成熟) 5々~ acR2, B2 CD22 B 10±5 Leu14, CD25 活化T,NK,HTLV感染 T细胞白血病细胞 100%母细胞 αIL~2R,Tac CD38 胸腺细胞,NK,活化T、 B亚群 34±10 Leu17, OKT10 CD56 NK, TC 15±6 Leu19, NKH-1 CD57 NK, T亚群 20±7 Leu7, HNK-1 CD71 淋巴母细胞、肿瘤细胞、Mo 100%淋巴细胞, dTr fR, OKT9 ─ B、Mo、Mφ、活化T 11±4 αHLA-DR, OKIa
共2页: 上一页 [1] 2 下一页
上一篇:溶血空斑形成试验 下一篇:流式细胞术:标本处理
|