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[ 文章来源: | 文章作者: | 发布时间:2006-11-01|  字体: [ ]  

(五) 附录
  1. Hank's液(无Ca2+、Mg2+)配制法
    NaCl 8.0克
    KCl 0.4克

    Na2HPO4·12H2O 0.12克
    KH2HPO4         0.06克
    葡萄糖          1.0克
    双蒸水          1000毫克
    1%酚红液          2毫克

  将上列成分混合后溶化,分装于500毫升盐水瓶内,8磅15分钟灭菌,4℃冰箱保存,临用时调PH至7.3~7.6。
  2. 细胞分层液配制法
    9%聚蔗糖         24份
    34%泛影葡胺        10%
  混合,测比重为1.077~1.078,G5玻璃滤器过滤除菌。4℃冰箱保存备用。
  3. 磷酸缓冲液(PB)
  原液:
  A液: 0.2M NaH2PO4溶液
     NaH2PO4           27.6克
     或NaH2PO4·2H2O       31.2克
     蒸馏水 溶解至        1000毫升
  B液:0.2M Ha2HPO4溶液
     Ha2HPO4·12H2O       71.6克
     蒸馏水溶解至1000毫升
  各种不同PH值PB的配法
───────────────────────────────────────
 PH     7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0
───────────────────────────────────────
A液(ml) 39.0 28.0 19.0 13.0 8.5 5.5
B液(ml) 61.0 72.0 81.0 87.0 91.0 94.5
───────────────────────────────────────
  举例:  0.1M  PH7.2PB
      A液   28毫升
      B液   72毫升
     加蒸馏水  100ml
  4. 血球保存液
  葡萄糖  2.05克 枸椽酸钠  0.8克
  氯化钠  0.42克 蒸馏水   100毫升
  将上述成分混匀,略加温使其溶解,分装小瓶(100毫升)。经10磅、10分钟高压灭菌。4℃保存备用。
  5. RPMI-1640培养液:

    RPMT-1640(FLOW公司出品)    1袋
    三蒸水            1000毫升
  电磁搅拌30分钟:1N HCl调PH7.2~7.4(约加2.5毫升),过滤除菌,作无菌试验,4℃保存。
  不完全RPMI-1640培养液:
   RPMI-1640             95毫升
   0.1M丙酮酸钠            1毫升
   0.2M谷氨酰胺             1毫升
   1M Hepes 1毫升
   7.5% NaHCO3 1毫升
   青霉素、链霉素(各1万单位)      1毫升
  完全RPMI-1640培养液
   不完全1640培养液          90毫升
   灭活胎牛(或新生牛)血清        10毫升

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