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(五) 附录 1. Hank's液(无Ca2+、Mg2+)配制法 NaCl 8.0克 KCl 0.4克
Na2HPO4·12H2O 0.12克 KH2HPO4 0.06克 葡萄糖 1.0克 双蒸水 1000毫克 1%酚红液 2毫克
将上列成分混合后溶化,分装于500毫升盐水瓶内,8磅15分钟灭菌,4℃冰箱保存,临用时调PH至7.3~7.6。 2. 细胞分层液配制法 9%聚蔗糖 24份 34%泛影葡胺 10% 混合,测比重为1.077~1.078,G5玻璃滤器过滤除菌。4℃冰箱保存备用。 3. 磷酸缓冲液(PB) 原液: A液: 0.2M NaH2PO4溶液 NaH2PO4 27.6克 或NaH2PO4·2H2O 31.2克 蒸馏水 溶解至 1000毫升 B液:0.2M Ha2HPO4溶液 Ha2HPO4·12H2O 71.6克 蒸馏水溶解至1000毫升 各种不同PH值PB的配法 ─────────────────────────────────────── PH 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 ─────────────────────────────────────── A液(ml) 39.0 28.0 19.0 13.0 8.5 5.5 B液(ml) 61.0 72.0 81.0 87.0 91.0 94.5 ─────────────────────────────────────── 举例: 0.1M PH7.2PB A液 28毫升 B液 72毫升 加蒸馏水 100ml 4. 血球保存液 葡萄糖 2.05克 枸椽酸钠 0.8克 氯化钠 0.42克 蒸馏水 100毫升 将上述成分混匀,略加温使其溶解,分装小瓶(100毫升)。经10磅、10分钟高压灭菌。4℃保存备用。 5. RPMI-1640培养液:
RPMT-1640(FLOW公司出品) 1袋 三蒸水 1000毫升 电磁搅拌30分钟:1N HCl调PH7.2~7.4(约加2.5毫升),过滤除菌,作无菌试验,4℃保存。 不完全RPMI-1640培养液: RPMI-1640 95毫升 0.1M丙酮酸钠 1毫升 0.2M谷氨酰胺 1毫升 1M Hepes 1毫升 7.5% NaHCO3 1毫升 青霉素、链霉素(各1万单位) 1毫升 完全RPMI-1640培养液 不完全1640培养液 90毫升 灭活胎牛(或新生牛)血清 10毫升
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