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微量补体结合反应(以钩端螺旋体病为例)
[ 文章来源: | 文章作者: | 发布时间:2006-11-01|  字体: [ ]  
本试验采取热法血清稀释法。每滴相当于0.02ml,总量为6滴,相当于0.12ml。
1.抗原  系各型菌株培养物多价抗原,按瓶签说明倍数稀释。
2.溶血素  正式试验时使用2个工作单位。
3.补体系冻干补体  用灭菌生理盐水作1︰5基础稀释。在溶血素效价测定和补体效价滴定时均作1︰60稀释,在正式试验时,用2个工作单位。
4.1%的红血球悬液,用灭菌生理盐水洗涤与配制。在使用时与等量含2个工作单位的溶血素液配成致敏红血球悬液。
5.阳性血清  正式试验时1︰100稀释。
6.阴性血清  正式试验时1︰10稀释。
7.生理盐水
(二)预实验
1.溶血素效价测定  用小试管做时,单位为ml;用血清稀释板做时,单位为滴。
⑴溶血素稀释:先将溶血素做1︰1 000基础稀释。见表6-10。
表6-10溶血素稀释表(单位:滴)

⑵溶血素效价测定  见表6-11。
表6-11溶血素效价测定表(单位:滴)

根据上述结果,溶血素效价为1︰5 000即为一个工作单位。2个工作单位溶血素为1︰2 500稀释度。
2.补体效价测定
⑴补体稀释,见表6-12。
表6-12补体稀释表(单位:ml)

管号

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

1:60补体

0.05

0.08

0.10

0.12

0.14

0.16

0.05

0.08

0.1

0.12

0.14

0.16

生理盐水

0.25

0.22

0.20

0.18

0.16

0.14

0.25

0.22

0.20

0.18

0.16

0.14

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