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2 结果与讨论
经统计学处理抗人DAF单克隆抗体IC6上清浓度在0.001~0.1μg/ml之间时,其含量与OD值呈线性关系(见图1)。分别将平卧式和直立式收获的

图 1 IC6上清标准曲线
Fig 1Standard curves of supernatant of IC6
细胞培养上清用间接ELISA法测定其效价及含量,结果3株杂交瘤细胞产生的抗人DAF单克隆抗体,其直立式培养上清的OD值均略高于平卧式培养的上清,将3株单克隆抗体的OD值从标准曲线上查得其含量,结果见表1。直立式比平卧式产量提高8~14倍,与Susan等的结果相符。直立式的特点是培养液用量多,且在生长过程中死亡细胞不断脱落至瓶底,
表1 平卧式与直立式培养单抗产量比较
Tab 1 Production of mAbs in horizontal and standing flask methods
| Cell line |
Horizontal culture |
Standing culture |
| Ig concentration
(μg/ml) |
Total yiele
(μg/falsk) |
Ig concentration
(μg/ml) |
Total yiele
(μg/falsk) |
| DG3 |
22.97 |
114.85 |
35.89 |
1076.7 |
| DG9 |
26.31 |
131.55 |
37.14 |
1114.2 |
| DA11 |
26.91 |
134.55 |
65.45 |
1963.5 |
使培养瓶留出更多的空间供活细胞生长而继续分泌抗体;平卧式培养,则死亡细胞占据空间影响活细胞的分裂增殖,需传代后方能继续增殖,增加污染机会及工作量。
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