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细胞培养(Cell culture)技术
授课人姓名:司徒镇强教授,吴军正教授,刘斌副教授
总学时及学分:30学时,1学分
内容简介:
1.细胞培养的基本知识:培养细胞的特性;培养细胞生长的条件
2.细胞培养的基本设备和准备工作:基本设备:清洗和灭菌;培养液配制
3.细胞培养的基本技术:基本操作和要求;原代培养;传代培养;细胞的冻存和复苏
4.特殊细胞培养概要
5.细胞培养的主要观察和检测技术:常规观察;细胞计数;细胞铺片的HE染色技术;MTT检测技术;克隆形成实验
授课方式及方法:
以大班讲课、示教,分组实习的方式进行教学。通过理论课讲授、教员示范实验技术、学员实际操作,为学员以后进一步学习及科研工作打下基础。
考试方法:笔试
教材:
《细胞培养》,世界图书出版公司,1996年
附:《细胞培养技术》教学要点
教学目的和意义:
本课程的教学对象包括各科的研究生,教学任务由口腔生物学教研室担任。由于细胞培养技术作为实验、研究工作的基本技术已广泛应用于各学科的多项领域,因此本课程的目的为:通过学习,使学员了解细胞培养的基本知识,初步掌握基本的培养技术及观察、检测方法,为其今后进一步学习及科研、实验创造基础。
教学要求:
本课程以实验操作为主。因此,教学中应讲清基本知识,实验示教要规范,并要组织好学员的实习操作。学员学习时应在了解基本知识的基础上,认真地按要求实际操作,以初步掌握各项实验技术的原则和要领。
教学内容和重点:
1.细胞培养的基本知识
(1)培养细胞的特性:包括培养细胞的生长方式和类型(贴附生长型、悬浮生长型;上皮样细胞、成纤维样细胞);培养细胞的生长特点(贴附、接触抑制、密度依赖性);培养细胞的生长过程(单个细胞的生长过程、细胞系的生长过程、每代细胞的生长过程)
(2)培养细胞的生长条件:营养需要,生存环境
2.细胞培养的基本设备和准备工作 简述细胞培养的基本设备;培养用品的清洗和灭菌;常用培养液的类型及配液的方法
3.细胞培养的基本技术
包括细胞培养的基本操作技术和要求:取材和分离的要点;原代培养的方法(组织块法、消化培养法);传代培养技术;细胞的冻存和复苏
4.特殊细胞培养方法概要
简述数种细胞常用的培养方法要点
5.细胞培养的观察和检测技术
包括常规观察(倒置显微镜观察方法),细胞计数法及生长曲线,细胞铺片HE染色技术,MTT法的原理及检测技术,克隆形成实验的方法及分析等。
教学时数分配,授课与实验之比:
本课程共30学时,讲课:实验约为1∶2
时数分配:
基本知识(含基本设备、培养液) 9
细胞培养技术 9
细胞培养检测技术 6
特殊细胞培养 3
考试 3
共计 30学时
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