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| [ 文章来源: | 文章作者:
| 发布时间:2006-10-08|
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各种肌组织均可用于培养,以心肌和骨骼肌较实用。 (-)骨骼肌细胞培养 1、出生1一2天的乳鼠,引颈处死。 2、无菌取大腿肌组织,切成0.3一0.5cm2小块后,用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过。 3、计数调整细胞密度。 4、快接种量2×106/皿入培养基培养。 5、培养基内含10%小牛血清,可加1%的胎汁以促进分化。 接种在胶原或胶原的底物上能促进细胞分化,明胶配置:用Hanks液配成0.01%明胶。 该细胞接种率约50%,细胞生长开始呈纺锤形,培养50-52小时后出现融合形成肌细胞状多核纤维。数日后融合停止,此时可观察到横纹,一般在融合后二、三天内能见到收缩现象。 (二)心肌细胞培养 心肌细胞是最早的培养材料,Carrel曾长期培养过心肌组织,至今心肌仍不失为好的培养物,最常用的是鸡胚心肌。 心肌比较容易培养和生长,可用悬滴培养、组织块培养和消化培养法,均可获良好的效果。取心室肌培养较好,原代培养的鸡胚心肌呈纺锤形,培养成功时,一周后可见节律性收缩现象。
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