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MTS检测细胞生长
[ 文章来源: | 文章作者: | 发布时间:2006-10-08|  字体: [ ]  

1.培养IL-2依赖细胞CTLL-2细胞HT-2细胞(检测IL-2),或者IL-3依赖细胞FDC-P1细胞FL5.12细胞(检测IL-3)到对数生长期。

2.96细胞培养板,每孔加0.1ml1×1042×104上述细胞之一的DMEM培养液(加10%小牛血清)。

3.每孔加0.1ml系列稀释的待测细胞因子(IL-2IL-3)样品或细胞因子标准品,在37 5 CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养24小时。

4.每孔加20μl MTS/PMS混合液,继续培养34小时显色。

5.检测前摇晃培养板10秒钟,混匀颜色。在酶联检测仪上,波长570nm(或490nm,或570nm690nm)处检测各孔的光吸收值(OD)。用样品稀释度对OD值(OD570OD490OD570/OD690)绘制剂量-反应曲线,根据标准品曲线计算样品中细胞因子的量。


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