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荧光定量聚合酶链反应检测人急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因方法的建立
[ 文章来源: | 文章作者: | 发布时间:2007-11-11|  字体: [ ]  

  

袁宏 王楠 李士军 孙国华 程艳杰 肖晓光 黄敏 

摘 要:目的制备荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法进行人急性早幼粒细胞白血病(APL)融合基因PML-RARα(bcr1型)mRNA表达量分析的RNA标准品,为白血病微小残留状态(MRD)的监测奠定基础.方法体外转录RNA的方法制备目的基因PML-RARα及管家基因ABL(Ablesongene)RNA标准品.结果目的基因PML-RARα的RNA标准品浓度分别为1×106、1×105、1×104、1×103、1×102拷贝/μl时CT(thresholdcycle,循环阈值,即产生可被检测到荧光信号所需的最少循环数)值分别为20.09、23.58、26.35、29.63、33.48.标准曲线的斜率为-3.30,相关系数为0.999.管家基因ABL标准品浓度分别为1×106、1×105、1×104、1×103、1×102拷贝/μl时,CT值分别为17.27、20.49、24.00、27.28、30.41.标准曲线的斜率为-3.24,相关系数为1.000.结论构建的两个RNA标准品可以得到良好的标准曲线,且标准曲线显示线形关系良好,标准品构建成功.

                                   摘自《中华检验医学杂志》2006年第3期


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