基础生化实验--Vc 含量测定

一、 教学目的与要求：

①     学习定量测定维生素C的原理和方法；

②     掌握滴定法的基本操作过程；

③     了解并掌握青椒中维生素C的含量测定。

二、 教学实验原理

    Vc是人类营养中啊生要的维生素之一。它分布广，绿色组织和水果 量更为丰富，V c有强的还原性，性条件加热并有氧化剂 存在时Vc易被氧化破坏。中性和酸性条件下，Vc能将2,6-二氯酚靛酚还原成无色的还原型2,6-二氯酚靛酚，同时Vc被氧化成脱氢Vc，因此可用2,6-二氯酚靛酚测样品中的V c含量。V c全部被氧化后，稍多加一点染料，使溶液呈淡粉红色，即为终点。如无其它干扰，则消耗的染料与样品中Vc含量成正比。

三、 教学主要内容：

1、Vc的提取：4g青椒（加5ml2%草酸，研磨成匀浆）→转入50ml容量瓶（残渣用2%草酸提取2—3次）→并入50ml容量瓶（加2%草酸35ml）→用1%草酸定容到刻度→过滤或离心→滤液（清液）备用。

2、空白滴定：取20ml空白液（加35 ml2%草酸，用1%草酸定容到50 ml）用2,6-二氯酚靛酚滴定。

3、标准液滴定，取标准Vc液20ml2—3份，置三角瓶中，用2 .6-二氯酚靛酚滴定。

4、样液滴定，取样液20ml各2份，置于三角瓶中，进行滴定。

四、 实验注意事项：

1、  终点的判定：2,6-二氯酚靛酚（兰）滴至样液（标准液）呈淡粉红色，并保持15—30秒不褪色，即这终点。

2、  2,6-二氯酚靛酚的体积一般在1—4ml之间，Vc含量高时，可稀释或减少用量。

3、  滴定要迅速，不超过2分钟。

五、 思考题：

1、  本实验的误差源？如何控制？

2、  试述Vc的功能