基础生化实验--蛋白质性质实验

一、 教学目的和要求：

①     了解构成蛋白质的基本结构单位及主要联接方式；

②     了解蛋白质和某些氨本酸的呈色反应原理；

③     学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。

二、 教学实验原理：

蛋白质分子中某些基团与显色剂作用，可生成特定颜色，颜色不同，蛋白质所含氨基酸不同，但颜色反应不是蛋白质专一反应，非蛋白质物质亦可产生相同颜色反应，不能用呈色反应来确定是否为蛋白质，但某些颜色反应可用于蛋白质定量。

蛋白质多为亲水胶体，水化膜和双电层是其稳定的两个重要因素，破坏这些因素（或与某些试剂结合成不溶盐后）则导致蛋白质沉淀，沉淀蛋白质在解除这些因素后，有的仍能恢复原状，另外一些破坏蛋白质空间结构的因素（如：重金属、强酸、强碱等）会使蛋白质变性，变性蛋白质有时其维持溶液稳定的因素仍然存在，所以并一定析出沉淀，因此变性蛋白质不一定会沉淀，而沉淀的蛋白质未必就变性。

三、 教学主要内容：

1、呈色反应按下表操作部分操作：

  2、沉淀反应按下表操作

3、 热沉淀蛋白质：按下表操作

四、 实验注意事项：

1、  本次实验内容繁多，请认真预习，做好预习报告，并严格按步骤操作。

2、  本次实验是定性实验，各种实验的现象都可能发生，要细心观察。

3、  本次实验有的试剂具强腐蚀性和刺激性，操作时要多加小心。

五、 思考题：

1、  如果蛋白质水解后双缩脲反应呈阴性时，可以对水解反应程度作出什么样的推论？

2、  茚三酮反应的阳性结果为何颜色？能否用茚三酮反应可靠鉴定蛋白质的存在？

　       3、  为什么蛋清可以作为铅或汞中毒的解毒剂？

　       4、  举例说明蛋白质沉淀与变性的关系。