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| [ 文章来源： | 文章作者：
| 发布时间：2007-04-02|
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反应介质的酸碱度即pH是影响非水介质酶中反应的重要因素之一，pH影响着酶的离子化，而离子化状态决定了酶的构象，酶的构象又影响了酶的活性和选择性。酶蛋白质中的可电离基团在有机溶剂中不能电离，因此在使用前必须对酶进行预先处理。酶可以是晶体、冻干或沉淀等物理状态，酶也可以吸附在载体表面产生理想的分布态，常用的载体有无机材料如硅胶、硅藻土或有机材料如非离子载体XAD—8、Accurel等。在非水介质中pH不易测定和调控，为此将酶先溶解在少量最适pH缓冲溶液序直接冻干或从最适pH缓冲溶液中沉淀，可以保持酶的电离状态，后者被形象地描述为酶的“pH记忆”。这样处理后可增加酶的反应速率，有时可增加一个数量级。从最适pH水溶液中沉淀的酶在有机溶剂介质中也表现出较高的酶活性。
在一些反应过程中，如酯水解或氨解反应中反应体系的pH会发生变化，因此将会影响酶的电离状态和酶活性。为了解决这一问题，可采用高疏水性酸和它的钠盐组成缓冲液对或高疏水性的碱与，臼的盐酸盐组成缓冲液对来维持反应体系的pH，常用有机酸有苯基硼酸、对硝基苯酚、三苯基乙酸、对甲苯磺酸和二苯基次磷酸、乙酸等，这种缓冲体系能有效地缓冲有机溶剂体系。其缺点是它们仅能在具有一定极性的溶剂中溶解，如3—戊酮、二噁烷、DMF、THF等。
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非水介质对酶活性的影响－