由于L－型氨基糖较难得到，本文与以往研究相同，利用（S）－TBMB甲酸与（R）－TBMB甲酸的消旋混合体与D型氨基糖反应，得到1：1的对应衍生物，其中（R）－TBMB甲酸的D－氨基糖衍生物被视（S）－TBMB甲酸与L－氨基糖的衍生物。

　　2－氨基－D－葡萄糖及合成得到的3,6－氨基D－葡萄糖、4－氨基甲基－D－葡萄糖苷，经(S)及（R，S）消旋体)TBMB甲酸荧光标识，完全乙酰基化得到对应的衍生物，被用于HNMR分析。生成的氨基糖衍生物均包括α、β异头体，其中α异头体较多。在其ＨＮＭＲ图谱中，叔丁基及甲基信号峰分别处于１.１及１.６附近的较高磁场，与其他信号峰无重叠。除β异头体的３－氨基糖外，其他氨基糖衍生物的Ｄ，Ｌ体的叔丁基及甲基的化学位移均有不同度的差异（表１）。

　　图２是一个典型的ＨＮＭＲ图谱，在这图谱中２－氨基葡萄糖Ｄ、Ｌ异构体的叔丁基、甲基、氨基及Ｃ１位连接的氢原子的信号峰均达到了很好的分离。

　　氨基糖经荧光标识及完全乙酰基化后，生成物无需纯化，浓缩后的反应溶液经稀释后可直接用于ＨＰＬＣ分析。ＨＰＬＣ分析法的全部分析时间低于２h，利用手性试剂（S）－TBMB的强荧光发光分析灵敏度可达到0.2pmol。

　　具体操作：１μg,的氨基糖溶于50μl 甲醇，加入3μl三乙基胺，（S）－TBMB酰氯的二氯甲烷溶液50μl［含0.5mg（S）－TBMB酰氯］，搅15 min，反应液经浓缩后加入50μl吡啶，10μl醋酸酐，将生成物完全乙酰基化。反应结束后加入20μl乙醇，真空浓缩，浓缩物经50μl  HPLC移动相溶液稀释后，取2μl 用于HPLC分析。

　　本文利用反相ＯＤＳ层析柱对:种氨基糖的Ｄ、Ｌ体进行了分析比较、结果如图３所示。

　　３种２－氨基糖的ＨＰＬＣ分析中，乙腈：异丙醇＝４：４：１为最佳移动相配比，柱温为３０度；:3，４，６－氨基葡萄糖的分析中，乙腈：水：异丙醇＝３：７：２为最佳移动相配比，柱温为４０度。ＨＰＬＣ分析结果表明除3－氨基葡萄糖之外，其他５种氨基糖的Ｄ、Ｌ异构体均有不同程度的分离，其中２－氨基葡萄糖的α异头体，２－氨基半乳糖的α异头体，β异头体，２－氨基甲基葡萄糖苷的α异头体，β异头体及６－氨基葡萄糖的β异头体的Ｄ、Ｌ体分离度（ＲＳ）大于或接近１.２５。所有α－氨基糖衍生物的ＨＰＬＣ分析结果均是Ｄ体的保留时间长于Ｌ体，而β体则相反，呈现一定的规律性。我们尝试了多种ＨＰＬＣ移动相配比应用于3－氨基葡萄糖，均未达到Ｄ、Ｌ体的分离。其原因可能是由于在糖衍生物中（Ｓ）－ＴＢＭＢ甲酸手性试剂处于相对对称的空间位置（图４），减小了手性试剂标识后Ｄ、Ｌ体间的结构差异。