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HPLC培训教程----II.基本概念和理论
[ 文章来源: | 文章作者: | 发布时间:2007-03-22|  字体: [ ]  
一、基本概念和术语
  1.色谱图和峰参数
  Ø色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile)。

  Ø基线(base line)——经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。
  Ø噪音(noise)——基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
  Ø漂移(drift)——基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
  Ø色谱峰(peak)——组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。流出曲线上的突起部分。正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线(高斯Gauss曲线)。不对称色谱峰有两种:前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。前者少见。
  Ø拖尾因子(tailing factor,T)T)——T=,用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)。《中国药典》规定T应为0.95~1.05。T<0.95为前延峰,T>1.05为拖尾峰。
  Ø峰底——基线上峰的起点至终点的距离。
  Ø峰高(peak height,h)——峰的最高点至峰底的距离。
  Ø峰宽(peak width,W)——峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。W=4σ
  Ø半峰宽(peak width at half-height,Wh/2)——峰高一半处的峰宽。Wh/2=2.355σ
  Ø标准偏差(standard deviation,σ)——正态分布曲线x=±1时(拐点)的峰宽之半。正常峰的拐点在峰高的0.607倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小,分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高;反之,σ大,峰形胖、柱效低。

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