下列步骤请在无菌环境下操作：

1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加热外管之尖端。

2、滴数滴无菌水于加热处，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。

3、取出隔热纤维纸和内管，以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。

4、( a ) 适用于细菌

用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。

( b ) 适用于霉菌、酵母菌

用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml无菌水，滴入内管内，待干燥粉末溶解后，以无菌吸管吸取并滴入约含有5ml无菌水之试管内，轻微震荡使其均匀后，静置30至60分钟。

5、取0.1-0.2 ml之菌体悬浮液于指定的平板培养基上，做划线分离培养或做成一系列之稀释，用无菌L型玻棒均匀涂抹，以检验菌种之纯度及活化情形，而剩余的菌体则全部移入指定的液体培养基内，并依指定的温度培养之。

6、某些菌种经过冷冻干燥保存后，迟滞期 ( lag period ) 较长，必须等培养二倍时间后才能长出，且再经过一、二次继代培养 (Subculture) 后才能正常生长。经过以上的努力后仍培养失败，才视为不能活化。

7、若菌种未能活化，或活化之菌落有疑问时，请于收到菌种之一个月内，以问题菌株反应单传真至本中心，即进行处理。

8．未开封之冷冻干燥管，请冷藏于4℃冰箱，切勿冷冻保存。