分子生物学简答题

1．阐述原核生物的转录终止。
   (1)转录终止的两种主要的机制是什么?
   (2)描述翻译怎样能调节转录终止。
   (3)为什么在细菌转录终止中很少涉及到Pho因子?
   (4)怎样能阻止转录的终止?
2．复制 DNA的聚合酶(DNA依赖的 DNA聚合酶)也有校正功能，解释为什么RNA聚合酶没有这种功能。
3．讨论原核生物基因表达的聚合作用反应定向的重要性。假如核糖体从3’端到5’端读它的模板 mRNA的话，那么将会发生什么情况?
4．概括细菌细胞内的转录过程。
5. 概括典型原核生物启动子的结构和功能，并解释什么是保守序列。
6．转录如何在基因或基因组末端终止?
7．(1)如何区分由启动子起始转录的RNA片段与5’端被加工过的RNA片段;
   (2)证明多肽是从氨基端到羧基端方向合成的。
8．比较 E．coli rRNA和 tRNA的转录和加工。
9．区别可诱导和可阻遏的基因调控。
10．衰减作用如何调控E. coli中色氨酸操纵子的表达?
11．比较并指出细菌和真核生物RNA  翻译机理的异同。
12．什么是摇摆假说?
13．指出E.coli和真核生物翻译起始的不同。
14．S．N Cohen于1973年构建了三个重组体， pSC102， pSC105， pSC109请说明这三个重组体是如何获得的?各说明了什么?
15．基因克隆是如何使含有单个基因的 DNA片段得到纯化的?
16．什么是细菌的限制—修饰系统(restriction-modificaton system, R-M system)
17．细菌的限制—修饰系统有什么意义?
18．说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。
19．Ⅰ类限制酶具有哪些特点?在基因工程中有什么作用?
20．Ⅲ类限制酶有哪些特点?
21．何谓限制性内切核酸酶的切割频率?
22．什么是限制性内切核酸酶的星号活性?受哪些因素影响?
23．双酶消化法(double digests)绘制限制性内切核酸酶酶谱的原理。
24．什么是 DNA多态性(DNA polymorphism)?
25．限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism，RFLP)。
26．计算下列三种酶各自在某染色体 DNA序列上识别位点间的平均距离：
    Alu Ⅰ：5’AGCT  3” Ecor Ⅰ: 5’GAATTC  3’
      3  TCGA  5’         3’CTTAGG  5’
AcyⅠ:5’GPuCGPyC  3’
        3’CPyGCPu5’
    (注： Py=任何一种嘧啶； Pu=任何一种嘌呤)
27．在细菌质粒 pBP1的四环素抗性基因 tetR的中间有一个HindⅡ的切点。用HindⅢ 切割果蝇基因组 DNA，以 pBP1为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆15带有果蝇的目的基因。用HindⅢ和EcoRV对克隆15进行了酶切分析，电泳结果如图15.1(用酶切的 pBP1质粒DNA作对照)，旁边标出了片段的大小。