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第06章 一. 简答 1. 从DNA到蛋白质的遗传信息传递过程可以分成几个阶段。(或是:遗传学中心法则是什么?) Key: j贮存遗传信息DNA的复制,双链DNA被复制出相同拷贝;kDNA作为模板合成RNA,将遗传信息转录到mRNA分子上;l以新生的mRNA为模板,将其核苷酸序列转译成氨基酸序列,合成多肽链。这3个阶段构成了遗传学中心法则,它阐明了遗传信息的传递方向是DNA—RNA—蛋白质。但在研究致癌性逆转录病毒(RNA病毒)中发现了转录酶,该酶催化以RNA为模板合成DNA的反应,此过程称为逆转录(reverse transcription)。虽然存在RNA的逆转录,但遗传信息从RNA向蛋白质的传递总是不可逆的。 2. 简述蛋白质合成的几个阶段。 Key: j起始 涉及在蛋白质前两个氨基酸之间肽键形成之前发生的反应。要求核糖体与mRNA结合形成一个含有第一个氨酰tRNA的起始复合体。在蛋白质合成中这是一个比较慢的步骤,通常决定mRNA被转移的速率 k延伸 包括从第一个太键合成,到加上最后一个氨基酸的所有反应。氨基酸是一次一个加到链上的;加氨基酸是蛋白质合成中最快的步骤。 l终止 包括释放已合成完毕的肽链所需的步骤;与此同时,核糖体同mRNA解离。 不同组的辅助因子,在每个阶段协助核糖体。在不同阶段通过GTP水解供给能量。 3. 真核生物的翻译起始,通过形成一个含有Met- TrnaI、eIF-2和GTP的三元复合物进行。复合物分哪两个阶段形成? Key:首先GTP结合至eIF-2;而GTP同eIF-2的结合提高了eIF-2对Met- tRNAi的亲和力,然后同其结合。
4.蛋白质合成中的起始因子eIF4E是一个管理的部位,它是通过什么来激活与失活的? Key:eIF4E是一个管理的部位,它通过磷酸化被激活,,当蛋白质合成增加时,刺激它开始磷酸化,蛋白质合成被阻碍时,刺激它停止磷酸化。eIF4F包括一个使eIF4E磷酸化的激酶亚基(叫Mnk1). eIF4E的获得也由连接到它(叫4EBP1,2,3)的蛋白所控制,来阻止它在起始时起作用。
5. 核糖体的A-,P-,E-位点分别是什么意思?真核细胞和细菌去负荷tRNA的过程相同吗? 解:A-位点是氨酰tRNA,P-位点是肽酰tRNA,E-位点是去负荷tRNA. 在细菌中,去负荷tRNA经过另一个位点-E位点离开核糖体。在真核生物中,去负荷tRNA被直接非至胞质溶胶中。
二. 论述题 1. AUG与GUG密码子的前后关系,应如何解释呢? Key:在一个起始复合物中,小亚单位以一种令起始密码子位于亚单位携带的部分P位点的方式,停留在mRNA上。这个可以变成起始复合物一部的,唯一的氨酰tRNA就是起始tRNA。其独一无二的特点是能直接进入部分位点而识别相应密码子。 当大亚基单位加入复合物时,起始fMet- tRNA f位于现已完整的P位点,而A位点适于同基因的第二个密码子互补的氨酰tRNA的进入。于是在起始与下一个氨酰tRNA之间形成了第一个肽键。 在一个AUG(或GUG)密码子位于一个核糖体结合位点之中时,起始之所以占优势,是由于当30S亚单位从头结合到mRNA时,只有起始tRNA才能进入产生的部分P位点。当密码子同继续转译一个mRNA的核糖体相遇时,由于只有规则的氨酰tRNA才能进入完全的A位点,因此内部的译读占优势。 2. 以细菌为例,说明延伸因子(在细菌中为EF-Tu)作用于核糖体的相关过程。 Key:EF-Tu这个因子,仅在其负责氨酰tRNA进入期间方与核糖体缔合。一旦氨酰tRNA处于适当位置,EF-Tu便离开核糖体,再与另一个氨酰tRNA一起运行。因此,EF-Tu同核糖体周期性缔合与解离,显示其作用为辅助因子的标志特性。EF-Tu携带一个鸟嘌呤核苷酸。该因子提供了其活性由鸟嘌呤核苷酸状态控制的蛋白质的另一个例证:①当GTP存在时,该因子处于活性状态。②当GTP水解为GDP时,该因子失活。③当GDP被GTP取代时,活性被恢复。每个细菌约有70000个EF-Tu分子(约占细菌总蛋白的5%),接近氨酰tRNA分子的数量。这表明大多数氨酰tRNA可能以三元复合物氨酰tRNA. EF-Tu·GTP形式存在。每个细胞只有10000个EF-Ts分子,与核糖体处于相同的数量级。
三. 思考题
在mRNA分子上进行翻译通过进化已有了特定的极性,具有与此方向相反的极性会有什么缺点?
Key:蛋白质合成只能等到mRNA分子合成完以后。在现有系统中,蛋白质的合成能够发生在mRNA正在从DNA拷贝出来的过程中。因此蛋白质合成的起始能早于逆向极性中可能的起始,以及mRNA对核酸酶的攻击较有抵抗力。
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