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[ 文章来源: | 文章作者: | 发布时间:2006-11-11|  字体: [ ]  

利用BLOCK-iT™ Dicer 方法有效地阻断基因的表达。使用BLOCK-iT™ Dicer RNAi Kit,你可以立刻得到结果,无需借助其它RNase III 酶制备的小片段,而且这些小片段可能不一定能提供你需要的阻断。


图3 Dicer酶切dsRNA 产生RNase III 酶裂解所不能产生的21-23 nt的d-siRNA
  按照生产商的说明书,使用BLOCK-iT™ Dicer Complete RNAi Kit和购买到的利用RNase III 酶的试剂盒产生d-siRNA。BLOCK-iT™ Dicer Complete RNAi Kit产生的大小为21-23nt的核苷酸(泳道2),RNase III 酶的产物12-15个核苷酸(泳道3)。通过与100bp的ladder比较显示(泳道1)。(4%E-Gel)

图4 使用BLOCK-iT™ Dicer 酶比使用一种细菌RNase III 酶产生的siRNA 提供更好的结果

GripTite™ 293 MSR 细胞转染lacZ和荧光素酶(luciferase)对照报告子,单独转染或同10ng或200ng的RNase III产生的siRNA或者Dicer产生的d-siRNA共转染(如图3所示)。在使用Lipofectamine™ 2000 转染48小时后,检测荧光素酶和β-gal活性。图示β-gal对荧光素酶比率,没有观测到荧光素酶表达的非特异性抑制。

获得有效RNAi结果所需要的的一切

BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi Kit提供获得和转染目的基因特异的siRNA库所需要的一切,包括:
· 高质量的Dicer酶,提供高产量的21-23个核苷酸的d-siRNA,有效的产生预期的RNAi结果
· 专门开发的RNAi纯化模块,从酶切反应物中纯化d-siRNA
· 提供已证明对哺乳动物细胞高效转染的、易于使用的Lipofectamine™ 2000转染试剂――对于有效的基因阻断至关重要
· BLOCK-iT™ RNAi TOPO® Transcription Kit提供高产量的长dsRNA的快速合成

使用BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi Kit,你可以筛选多达5个基因,同时得到可靠的结果。你将会快速进入到RNAi研究的下一阶段。

快速、高产量的RNAi TOPO®转染试剂盒


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